多款双抗进入临床前阶段，复宏汉霖新型抗体研发成就初现
双抗的“双特异性”可通过沉链可变区单域抗体（VHH）或单链可变区（scFv）的组合来实现。复宏汉霖已成功成立了超大库容人源化羊驼VHH噬菌体展示库以及高效的scFv构建平台，在积极推动20项基于VHH或scFv的新型抗体/融合蛋白项目在临床前的研发。其中，双特异性抗体HLX301（蕴含TIGIT靶点的双特异性抗体）与HLX35（蕴含4-1BB靶点的双特异性抗体）已实现了初步的临床前钻研并递交了有关的中国与国际专利申请，更多的新型抗体项目也将在近期迎来关键进展。
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在肿瘤医治领域，通过分歧靶点的选择与组合，双抗可带来令人惊喜的成效，蕴含（1）招募更多职能性免疫细胞靶向地杀伤或抑造肿瘤细胞；（2）能够同时作用于拥有协同作用的信号通路；（3）通过加强靶向特异性可能降低所需用药剂量，削减脱靶毒性；（4）若双抗的两个表位为同靶点的分歧表位，则能够加强作用成效并有效地预防耐药产生。
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VHH与scFv——双特异性抗体的构建基础
在传统单克隆抗体的基础上，随着抗体工程等生物技术的不休发展以及成药靶点的逐步堆集，抗体药物可能的结构与职能出现了前所未有的多样性。双特异性抗体（Bispecific antibody, BsAb），通常简称“双抗”，是近年来最受关注、进展最快、利用远景最好的新型抗体之一。与单抗只能鉴别一个抗原表位分歧，双抗可能与两个分歧靶点或者与统一靶点的两个分歧抗原表位相结合，由此可能作用于两个信号传导蹊径或加强对统一信号传导蹊径的作用。
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双抗在肿瘤免疫医治领域的潜力尤其值得关注。例如双抗可同时靶向肿瘤细胞表表的特异性靶点（如CD20、CD38、c-MET等）与T细胞等免疫细胞表表的靶点（如PD-1、4-1BB、TIGIT）。肿瘤特异性靶点往往在肿瘤的成长与转移中起沉要作用，通过与肿瘤特异性靶点的结合，双特异性抗体可能阐扬抑造肿瘤成长与迁徙的作用；同时通过与免疫细胞表表靶点的结合，又可能阐扬调节肿瘤免疫反映的作用，以抑造肿瘤免疫逃逸或加强免疫反映；拥有Fc端的双特异性抗体还可通过与免疫细胞表表Fc受体的相互作用诱导免疫细胞对肿瘤的吞噬或细胞毒作用，杀伤肿瘤细胞。
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在空间上，由于双特异性抗体与肿瘤特异性靶点的结合，使得另一靶点带来的免疫调节作用也重要产生在肿瘤组织周围，可能加强免疫调节的作用成效，削减免疫调节对正常组织造成的毒副作用，即脱靶毒性，这一作用特点是目前的结合疗法所无法实现的。
靶点组合确立后，在双抗的设计中，针对两个指标靶点别离构建拥有优良特异性的结合区域是保障双抗可能具备梦想作用成效的关键。针对这一挑战，两种抗体结构单元--单链可变区（scFv）与沉链可变区单域抗体（VHH）可能阐扬主题作用，成为双抗构建中的“基石”。
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抗体的结构拥有？榛奶氐，分歧的？橹湓诮峁褂胫澳苌隙枷喽远懒？固逵氚械憬刑匾煨约鹩虢岷系哪？槲固錐ab端的可变区。一个齐全的Fab端可变区被称为单链可变区（scFv），蕴含一个沉链可变区与一个轻链可变区。其中沉链可变区在与靶点的鉴别与结合中起到重要作用，单个沉链可变区组成的单域抗体即VHH。VHH与scFv都能独立承担鉴别靶点、结合靶点的工作，因而双抗的“双特异性”可通过VHH或scFv的组合来实现。萦绕VHH与scFv的构建技术，复宏汉霖研发团队进行了沉点攻关，已成功成立了超大库容（2×1012）人源化羊驼VHH噬菌体展示库以及高效的scFv构建平台。
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复宏汉霖基于VHH的新型抗体研发进展
复宏汉霖VHH噬菌体展示库骨架区已大部门置换成人类序列，同时也保留了FW2区域幼部门原有的亲水性氨基酸，既实现了抗体的高度人源化又保留了羊驼单域抗体原有的亲水性优势。同时高达80%以上的克隆拥有齐全的盛开阅读框（Open Reading Frame），保障了从库中筛选出的VHH基因片段可能正常表白对应的VHH结构。利用这个VHH噬菌体展示库进行特定靶点的VHH结构筛选，无需通过传统的免疫动物的步骤，也无需人源化刷新或亲和力成熟等复杂过程，显著提高了筛选效能。对于大部门指标靶点，复宏汉霖研发团队均可能从VHH噬菌体展示库中急剧筛选出拥有高亲和力的VHH结构，进一步组成双特异性抗体以及其他新型抗体或者融合蛋白。
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基于VHH的双抗结构示例[1]
利用这一壮大的VHH噬菌体展示库，复宏汉霖已发展8项基于VHH的新型抗体/融合蛋白项目，目前均处于临床前研发阶段。其中HLX301为蕴含TIGIT靶点的双特异性抗体，其TIGIT结合域即起源于VHH噬菌体展示库筛选出的对TIGIT拥有高亲和力、高特异性的VHH片段。TIGIT在肿瘤浸润T细胞表表有丰硕的表白，属于肿瘤免疫查抄点蛋白，可能抑造效应T细胞对肿瘤的杀伤，亦能加强调节T细胞对肿瘤免疫反映的抑造。未来，萦绕TIGIT靶点的创新研发有望极大丰硕肿瘤免疫医治的选择。
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复宏汉霖基于scFv的新型抗体研发进展
复宏汉霖壮大矫捷的scFv构建平台重要得益于多年铸成的单抗发现及抗体工程刷新能力。另表，在打造当前深厚、靶点覆盖宽泛的单抗产品管线的同时，复宏汉霖天然而然地萦绕有关信号传导通路堆集了很多药效结构等方面的数据与经验，也为scFv构建平台奠定了基础。目前，复宏汉霖在积极推动12项基于scFv的新型抗体/融合蛋白项目，这些项目目前处于临床前研发的分歧阶段。
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基于scFv的双抗结构示例[1]
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HLX35为蕴含4-1BB（CD137）靶点的双特异性抗体，4-1BB重要表白于活化的T细胞和NK细胞表表，是T细胞协同刺激分子。HLX35的4-1BB结合域起源于抗 4-1BB单克隆抗体的scFv片段，与4-1BB特异性结合后可能产生T细胞协同刺激信号。钻研批注，4-1BB可能加强T细胞的效应能力与细胞因子的排泄，延缓T细胞凋亡，同时可能加强天然杀伤（NK）细胞的细胞毒性作用[2]。
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复宏汉霖已实现了HLX301与HLX35初步的临床前体表及体内钻研以及细胞株开发，在进前进一步的临床前评估，有望在2021年递交有关临床试验申请，复宏汉霖也已递交有关中国与国际专利的申请，并已获得有关抗TIGIT单域抗体的中国专利授权。
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未来，复宏汉霖将充分利用多年堆集的抗体领域研发经验，尤其是近年来打造的VHH噬菌体展示库与scFv构建技术，加快推动HLX301、HLX35以及后续双特异性抗体和其他新型抗体/融合蛋白的创新研发，其中多款都有成为全球同类首款（first-in-class）的潜力。持续以当先的抗体科学与技术不休追求为患者带来获益的创新医治伎俩。
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【参考文件】
- Bates A, Power CA. David vs. Goliath: the structure, function, and clinical prospects of antibody fragments[J]. Antibodies, 2019, 8(2): 28.
- Chester C, Sanmamed MF, Wang J, et al. Immunotherapy targeting 4-1BB: mechanistic rationale, clinical results, and future strategies[J]. Blood, 2018, 131(1): 49-57.
